Introduzione alle Cellule Staminali Mesenchimali (MSC)
Le cellule stromali provenienti da diversi tessuti mesenchimali hanno dimostrato multipotenza, proliferando e differenziando in una varietà di tipi cellulari tra cui osteoblasti, adipociti e condrociti.
La fonte più studiata di cellule staminali mesenchimali multipotenti (MSC) è il midollo osseo, ottenuto dalla cresta iliaca di donatori adulti.
Recentemente, le MSC sono state isolate anche da altri tessuti, tra cui:
- Tessuto adiposo
- Denti
- Ossa
- Muscoli
- Placenta
- Fegato
- Pancreas
- Cordone ombelicale
- Sangue cordonale
Sfide nell'Ottenimento delle MSC Tradizionali
Nella maggior parte dei casi, e in particolare per le fonti autologhe, l'isolamento delle MSC richiede interventi invasivi e traumatici che non sempre sono fattibili e comportano un notevole disagio per il paziente.
Il Tessuto Endometriale come Fonte Alternativa di MSC
Nel tentativo di identificare una fonte di MSC diversa e più accessibile, la ricerca si è concentrata sul tessuto endometriale, definito anche tessuto deciduale (DT).
Durante ogni ciclo mestruale, si osserva una rapida ricrescita del tessuto e dei vasi sanguigni, seguita da uno sfaldamento dello stesso alla fine del ciclo.
Sulla base di risultati recenti riportati in letteratura, si è ipotizzato che l'endometrio contenesse una popolazione eterogenea di cellule, alcune delle quali in possesso di proprietà simili alle cellule staminali:
- Auto-rinnovamento
- Alto potenziale proliferativo
- Capacità di differenziare verso varie linee cellulari
Obiettivi della Ricerca
La tesi sperimentale si propone di caratterizzare il tessuto deciduale come una nuova fonte di MSC, isolandole in prospettiva di possibili applicazioni nei campi della:
- Medicina rigenerativa
- Terapia mirata contro il cancro
- Cura di altre condizioni patologiche
La possibilità di ottenere cellule progenitrici tramite una procedura non invasiva, sebbene con una limitazione di genere, apre la strada a un'intensa attività di ricerca, superando alcuni dei limiti attuali, come la difficoltà di ottenere queste cellule in quantità sufficiente per scopi clinici.
Metodologia e Risultati Preliminari
A questo scopo, sono state isolate cellule derivanti dal tessuto deciduale di 3 donatori. Dopo il processamento, le cellule sono state coltivate in fiasche di coltura con appositi terreni.
Le successive analisi citofluorimetriche hanno rivelato che, dopo una piccola espansione iniziale, queste cellule esprimono marcatori mesenchimali, tra cui:
- CD90
- CD105
- CD73
- CD56
- CD146
Sono stati inoltre identificati marcatori associati alla pluripotenza, come SSEA-4.
Questi risultati hanno permesso di definirle preliminarmente come MSC da tessuto deciduale (DT-MSC).
Caratterizzazione Funzionale delle DT-MSC
Per confermare ulteriormente la natura biologica di questi progenitori, è stato verificato che le DT-MSC possiedono un notevole potenziale clonogenico e possono essere espanse estesamente in vitro come cellule fibroblastioidi aderenti.
Inoltre, i saggi di induzione hanno mostrato la loro capacità di differenziare nelle linee:
- Osteogenica
- Adipogenica
- Condrogenica
Modificazione Genetica delle DT-MSC
Infine, è stato possibile modificare geneticamente queste cellule tramite un vettore retrovirale codificante per la Green Fluorescent Protein (GFP).
Conclusioni Preliminari
Questa tesi sperimentale riporta un'iniziale caratterizzazione funzionale delle DT-MSC, anche in confronto a MSC derivanti da altre fonti. Gli aspetti chiave della ricerca includono:
- Potenziali clonogenici e proliferativi, fondamentali per valutare l'idoneità delle DT-MSC per applicazioni a lungo termine nella medicina rigenerativa.
- Espressione di marcatori, stabiliti per determinare un pannello per la loro identificazione.
- Capacità di differenziazione, con particolare attenzione al loro potenziale di differenziare in linee mesenchimali.
- Suscettibilità alla manipolazione genetica, per potenziali approcci di terapia genica.